INSTITUTO TECNOLÓGICO DE CD. ALTAMIRANO NOMBRE DE LA PRÁCTICA: CULTIVO Y PROPAGACIÓN EN MEDIO LIQUIDO DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE HETERÓTROFOS MATERIA: PROTOTOZOOLOGIA SEMESTRE: 2 MAESTRA: JAZMÍN CORTES SARABIA ALUMNOS: GUSTAVO ÁNGEL GARCÍA GÓMEZ ROSA ELENA ESTRADA BENIGNO ZAMIRA AGUIRRE MORENO JESUS HERRERA BELTRAN KAREN LILIANA SANTAMARIA BERRUM H. RICHARD ORDUÑO MARIANO NOMBRE DE LA PRÁCTICA Cultivo y propagación in vitro en medio liquido de protozoarios de vida libre heterótrofos. OBJETIVO Que el alumno aprenda los pasos para llevar a cabo el método de cultivo y propagación de los protozoarios INTRODUCCIÓN Los protozoos son seres unicelulares eucarióticos de nutrición heterótrofa, que necesitan vivir en un medio húmedo. Algunos son parásitos y producen enfermedades como el paludismo, enfermedad del sueño, etc. Con vida libre los hay dulceacuícolas y marinos, y forman parte del plancton. Para desplazarse pueden emplear pseudópodos, cilios o flagelos. Los ciliados dulceacuícolas poseen una vacuola pulsátil con funciones excretoras y osmoreguladora. Cuando las condiciones del medio se vuelven adversas, como es el caso de una desecación, se rodean de una envuelta resistente y reducen al mínimo su actividad vital, se produce un enquistamiento. Su reproducción más frecuente es la asexual, por bipartición, aunque algunos presentan una reproducción sexual muy característica, que se llama conjugación. MATERIALES Y MÉTODOS v Alcohol v Agua destilada v Potenciómetro v Algodón v Picetas v Balanza analítica v Centrifuga v Asas v Agujas de disección v Frascos de cristal ( jugos del valle) v Viales transparentes o color ámbar (5 ml) v Guantes de látex v Cubre boca v Mechero de bunsen v Campana de flujo laminar v Olla de presión v Microscopio v Estereoscopio v Lápiz v Maskquitape v Cubreobjetos u portaobjetos v Colorantes: cristal violeta, fucsina ácida, safranina v Lugol v Aceite de inmersión v Cámara fotográfica v Tubos de centrifuga (ependoorff) v Espátulas 1.- selección de muestras de agua estancada 2.- con el estetoscopio se hizo captura de protozoarios con pipetas Pasteur 3.- Después de la captura se agregaron en tubos ependorff los suficientes protozoarios de aproximadamente 2 ml. 4.- se procedió a centrifugarse a 250 RPM (revoluciones por minuto ) durante 20 minutos a 28 ºC 5.- Esterilizamos todos los frascos a 118 ºC por 18 minutos 6.- Se dejaron enfriar por 24 horas 7.- Para empezar la siembra de protozoarios con un asa esterilizada se hacia la extracción de algunos protozoarios. 8.- después de las 24 horas observamos que los frascos tenían un tipo de espuma que nos indicaba que estaban iniciando el crecimiento del cultivo RESULTADOS Y DISCUSION CONCLUSIONES Los protozoarios tienen gran importancia ecológica, los flagelos autótrofos, como productores de materia orgánica en ambientes acuáticos, en tanto que los flagelados heterótrofos, muchos ciliados y sarcodarios, al alimentarse con otros organismos actúan como depredadores y en la descomposición de la materia orgánica. La participación de estos en las cadenas alimentarias, los hace particularmente importantes en el suelo y aguas contaminadas. Algunas viven como comensales o en asociaciones mutualistas dentro del tracto intestinal de los animales; otros muchos son parásitos, estos presentan una marcada especificidad por los animales que infectan. El aislamiento y cultivo de protozoarios de vida libre es relativamente fácil; generalmente se parte de un cultivo mixto, esto es muy conveniente, ya que la mayoría de los protozoarios se alimentan de otros microorganismos. Las infusiones de materiales vegetales son buenos medios de para muchas especies de protozoarios; en tales infusiones se desarrollan numerosas bacterias que les sirven de alimento. Los protozoarios tienen preferencia por las bacterias Gram negativas, por lo que frecuentemente se inoculan las infusiones vegetales, previamente esterilizadas, con cultivos bacterianos especialmente de Enterobacter aerogenes. La mayoría de los protozoarios requieren de alimento particulado y pocos crecen en medios nutritivos completamente solubles, siendo éstos últimos más fácil de purificar. PALABRAS CLAVES Ø In vitro Ø Esterilización Ø Centrifugación Ø RPM ( revoluciones por minuto ) Ø Propagación Ø Heterótrofo BIBLIOGRAFIA Taylor, F. J. (2003). «The collapse of the two-kingdom system, the rise of protistology and the founding of the International Society for Evolutionary Protozoology (ISEP) ». Int J Syst Evol Microbiol 53 (Pt 6): pp. 1707-14. DETERMINACIÓN POR MUESTRAS COMPARATIVAS EN LA DENSIDAD POBLACIONAL